Работа 1. определение мочевой кислоты в биологических жидкостях

      Комментарии к записи Работа 1. определение мочевой кислоты в биологических жидкостях отключены

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СТУДЕНТОВ

к практическим занятиям

Модуль VI. Обмен и функции нуклеиновых кислот. Матричные биосинтезы

учебной дисциплины (модуля)«Биохимия»

для специальности Лечебное дело

курс II семестр 4

Составитель:Артюкова О.А., к.б.н., доцентРецензент:Лемешко Т.Н., к.б.н., доцент

Владивосток – 2016 г.

Практическое занятие № 5 (29)

Тема:«Биосинтез и катаболизм нуклеотидов. Количественное определение мочевой кислоты в крови и моче»

Мотивация: получить представление о судьбе нуклеиновых кислот (как эндогенных, так и экзогенных) в организме, образовании конечных продуктов обмена; уметь использовать эти знания для объяснения причин нарушений пуринового обмена и биохимических методах коррекции.

Общая цель:Полученные по данной теме знания формируют общекультурные и профессиональные компетенции (ПК- 3, ПК-15) , необходимые в последующем для изучения вопросов профессиональной направленности.

Конкретные цели и задачи.

— знатьбиосинтез и катаболизм пуриновых нуклеотидов и нарушения синтеза, приводящие к развитию патологий (подагра, синдром Леш-Найхана); биосинтез и катаболизм пиримидиновых нуклеотидов и нарушения синтеза, приводящие к развитию патологий (ортацидурия); образование дезоксирибонуклеотидов и нарушения синтеза, приводящие к развитию иммунодефицитов. Ингибиторы биосинтеза рибо-и дезоксирибонуклеотидов, используемые как противовирусные и противоопухолевые препараты. Функции нуклеотидов и их производных в клетках организма.

— уметь использовать знания о путях синтеза и распада нуклеотидов для понимания патогенеза заболеваний, связанных с нарушением их метаболизма; объяснять действие ингибиторов биосинтеза рибо-и дезоксирибонуклеотидов, используемых в качестве противовирусных и противоопухолевых препаратов.

— владетьметодом анализа получаемой по дисциплине информации с позиции междисциплинарных связей и будущих задач профессиональной деятельности. Владеть медико-функциональным понятийным аппаратом (терминами):подагра, гиперурикемия, гипоурикемия, гиперурикурия (урикозурия), синдром Леш-Нихана, ксантинурия,

оротацидурия.

Вопросы, изученные на предшествующих дисциплинах и необходимые для освоения темы:

1. Строение и свойства азотистых оснований, нуклеотидов и нуклеиновых кислот (биоорганическая химия)

Этапы проведения занятия:

1. Вводная часть

2. Основная часть занятия: лабораторная работа

3. Заключительная часть занятия

Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию

Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:

1. Обмен и функция нуклеиновых кислот.

2. Биосинтез и катаболизм азотистых оснований нуклеиновых кислот. Представление о биосинтезе пуриновых нуклеотидов. Роль ФРПФ. Происхождение атомов пуринового кольца. ИМФ как предшественник АМФ и ГМФ. Регуляция синтеза пуриновых нуклеотидов.

3. Катаболизм пуриновых нуклеотидов. Пути регенерации пуриновых нуклеотидов.

4. Нарушения метаболизма пуринов: подагра, синдром Леша-Найхана.

5. Синтез пиримидиновых нуклеотидов.

6. Синтез дезоксирибонуклеотидов.

7. Использование ингибиторов синтеза дезоксирибонуклеотидов в химиотерапии онкологических заболеваний.

8. Регуляция синтеза пиримидинов. Конечные продукты распада пиримидинов. Нарушения метаболизма пиримидинов.

Ориентировочная основа деятельности (ООД) студентов для проведения лабораторной работы

Работа 1. Определение мочевой кислоты в биологических жидкостях

Принцип метода. Мочевая кислота восстанавливает фосфорно-вольфрамовый реактив с образованием соединения голубого цвета, оптическая плотность которого при 640 нм пропорциональна концентрации мочевой кислоты в исследуемой жидкости (моча)

Порядок выполнения работы:

Реактивы Калибровочная проба Опытная проба
Моча (разведение 1:10) 2 мл
Калибровочный раствор мочевой кислоты(0,03 ммоль/л) 2 мл
Раствор карбоната натрия (20%) 1 мл 1 мл
Фосфорновольфрамовый реактив 0,5 мл 0,5 мл

Содержимое пробирок тщательно перемешать. Через 30 мин определить оптическую плотность на ФЭКе при 640 нм (красный светофильтр) против воды в кювете с толщиной оптического слоя 1 см. Расчет экскреции мочевой кислоты производится по формуле:

С = ( Еопыт : Екалиб) х 0,03 х 10 х Д

где: С – концентрация мочевой кислоты в пробе

Еопыт — оптическая плотность опытной пробы

Екалиб – оптическая плотность калибровочной пробы

0,03 — содержание мочевой кислоты в калибровочной пробе

10 — перерасчет на разведение мочи

Д — суточный диурез ( — 1,5 л/сут, + — 1,2 л/сут, дети – 1 л/сут)

Нормальные значения:

Экскреция мочевой кислоты с мочой: 1,6 – 3,54 ммоль/сут(270 – 600 мг/сут)

Дополнительные материалы:

ПЯТЬ ПРОДУКТОВ,КОТОРЫЕ ПОМОГАЮТ В БОРЬБЕ С ПОДАГРОЙ И ВЫВОДЯТ МОЧЕВУЮ КИСЛОТУ


Похожие статьи: