Особенности абсорбционной спектроскопии для биологических макромолекул

      Комментарии к записи Особенности абсорбционной спектроскопии для биологических макромолекул отключены

Параметры, измеряемые в абсорбционной спектроскопии.

На рис. 4 показаны спектры, снятые в видимой и УФ-областях для двух биологических молекул [4]. Обычно определяются величины D или e. Длина волны, соответствующая максимуму поглощения, называется lмакс, и именно при этой длине волны обычно определяют e. Некоторые полосы поглощения состоят из многочисленных пиков, и часто регистрируют длины волн, соответствующие пикам, имеющим меньшие молярные коэффициенты погашения. Эти длины волн иногда также называют lмакс или указывают, что вещество имеет максимумы поглощения при l1, l2,… ln . Иногда измеряют ширину полосы.

В табл. 2 приведен список величин lмакс и e хромофоров, часто встречающихся в биологических объектах [4]

Электронные переходы полипептидных и полинуклеотидных цепей и, тем самым, белков и нуклеиновых кислот расположены в УФ-области спектра. Полосы поглощения пептидной связи — СО — NН — лежат в области 185 — 240 нм, здесь же и в более коротковолновой области расположены полосы поглощения алифатических боковых цепей аминокислотных остатков. Ароматические остатки Трп, Фен, Тир имеют полосы поглощения в обл. 280 нм. Азотистые основания в нуклеиновых кислотах поглощают свет в области 260 нм. Таким образом, белки и нуклеиновые кислоты бесцветны, они не поглощают видимый свет.

Таблица 2. Максимумы поглощения и молярные коэффициенты погашения e различных веществ при нейтральных значениях рН, используемых для биологических исследований.

Соединение lмакс, нм e при lмакс (х10-3)
Триптофан* 5,6
47,0
Тирозин* 1,4
8,0
48,0
Фенилаланин* 0,2
9,3
Гистидин* 5,9
Цистеин* 0,3
Аденин 260,5 13,4
Аденозин 259,5 14,9
Гуанин 10,7
Гуанозин 252,5 13,6
Цитозин 6,1
Цитидин 9,1
Урацил 259,5 8,2
Уридин 261,1 10,1
Тимин 264,5 7,9
Тимидин 9,7
ДНК 6,6
РНК 7,4
* Поглощение других аминокислот незначительно.
Особенности абсорбционной спектроскопии для биологических макромолекул Рис 4. Сравнение спектров поглощения двух биологических молекул: флавинмононуклеотида (а) и фикоцианина (б). Спектры можно использовать для идентификации соединения.

Дополнительные материалы:

Моделирование биомолекул


Похожие статьи: